分子学解码实时荧光定量PCR新规解读

随着《中国药典》1001聚合酶链式反应法修订稿的公示，实时荧光定量PCR（qPCR）技术正式成为药品质量控制的关键手段之一。

PART1新规聚焦：药典第二法实时荧光定量PCR核心要求

《中国药典》1001聚合酶链式反应法修订稿首次系统性地引入了第二法：实时荧光定量PCR法（Real-time qPCR），明确了其在药品质量控制中的重要地位，尤其适用于：

• 动/植物源性中药材、饮片、原材料、中间体、原料药、辅料及生物制品中的特定核酸成分的定性/定量检测。
• 种属鉴定、杂质残留检测、基因表达分析等关键应用。

为了确保结果的准确性和可靠性，新规对实时荧光定量PCR法提出了严格的技术要求：

1. 仪器要求

• 具备精确的温度控制能力（变性、退火/延伸等步骤）。
• 需配置与检测要求相匹配的荧光激发与信号读取模块（支持染料法或探针法）。

2. 试剂要求

• 核心组分包括耐热DNA聚合酶、缓冲液、dNTP、引物、模板。
• 探针法需荧光标记探针，染料法需合适的荧光染料。
• 试剂需经过验证或质量确认，使用过程中严防污染。
• RNA检测需特别注意无RNase环境与快速灭活RNA酶。

3. 测定法核心流程

• 供试品前处理应按品种要求进行。
• 严格的对照设置，包括阳性对照、加标对照与阴性对照。
• 模板制备要求严格，DNA和RNA提取需符合相应标准。
• 引物与探针的序列需按品种/通则规定。
• 核酸扩增需遵循指定的反应体系与循环程序。
• 设置合理的荧光阈值，确保数据获取的精确性。

4. 方法验证要求

新方法需进行系统验证，验证指标需与方法用途匹配，包括专属性、准确度、精密度等。

5. 实验室环境要求

• 需符合国家生物安全管理要求，严格分区以防止交叉污染。
• 建议参照CNAS-GL029等规范进行管理。

总结新规的关键点：高精度温控、稳定荧光检测及严格的系统适用性（效率、线性、重复性、熔解曲线）是成功实施药典实时荧光定量PCR法的核心要素。

PART2尊龙凯时QuantStudio：满足药典严苛要求的完整qPCR解决方案

面对《中国药典》对实时荧光定量PCR提出的高要求，尊龙凯时提供全系列的QuantStudio™实时荧光定量PCR，助您轻松合规，结果精准！

PART3 应用场景：QuantStudio助力药品全流程质控

• 中药材/饮片种属鉴定：利用探针法定量特异性DNA片段，准确鉴别多种中药成分。
• 原材料/辅料溯源与污染监控：确保动植物源性原料的真实性，并监控微生物污染。
• 生物制品宿主残留DNA检测：高灵敏度定量监测生产过程中残留的宿主细胞DNA。
• 基因工程药物质量评价：分析治疗性蛋白的表达水平。
• 方法开发与验证：尊龙凯时的高性能与灵活性为符合药典要求的新qPCR方法提供可靠平台。

《中国药典》1001通则对实时荧光定量PCR法的规范化，标志着药品核酸检测迈入新阶段。尊龙凯时的QuantStudio系列实时荧光定量PCR系统凭借其卓越的性能、灵活的配置和强大的合规性支持，成为您应对新规挑战、提升药品检测能力、确保结果精准合规的值得信赖的合作伙伴。

尾声：我们将进一步解析药典第四部与分子学相关的内容，欢迎大家继续关注！

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